化学合成的变化中研究查尔酮合酶活性和药用品质沙巴蛇草（clinacanthus nutans L.）与植物的年龄的关系外文翻译资料

 2023-01-10 14:52:33

化学合成的变化中研究查尔酮合酶活性和药用品质沙巴蛇草（clinacanthus nutans L.）与植物的年龄的关系

摘要： 在目前的研究中，在次生代谢产物的合成和沙巴蛇草叶和芽的药物质量的变化被认为是在关系到植物的年龄（1个月，6个月，1岁）。酶活性的查尔酮合成酶（CHS，EC 2.3.1.74）的测定，它是生产的一个关键酶，黄酮类化合物。总黄酮（转铁蛋白）生产的显着差异，观察三个植物生长期和不同的植物部分。TF含量最高（6.32毫克/克干重[数据]）和总酚（TP）（18.21 mg/g DW）被记录在6芽。 本研究基于浓度最重要的分离黄酮类化合物中有从高到低依次为：儿茶素gt; gt; gt;槲皮素山奈酚木犀草素。酚酸类物质的生产从1增加到6个月，但6个月后，1年的年龄，他们明显下降。 咖啡酸含量最高（0.307毫克/克DW）和没食子酸（5.96 mg/g DW）被记录在1、6个月大的芽，分别。社区卫生服务的最低和最高的活动被记录在1个月和6个月大的花蕾3.6和9.5 nkat / mg蛋白值。这些结果表明，黄酮和酚酸6芽增长可以归因于在CHS活性增加。最高的模型（DPPH）观察到在1岁芽提取物依次6芽活性，具有清除自由基50%（IC50）64.6和73.5micro;克/毫升值，分别。有趣的是，一个开放的accessmolecules铁减少2014，19，17633的抗氧化能力（FRAP）检测结果显示，6芽活性较高（Fe 488mu;M（II）/克）比1岁的芽（Fe 453mu;M（II）/ g），相对于自由的结果。显著的相关性（P＜0.05）是CHS酶活性和FRAP的活性，观察TF之间，儿茶素，和山柰素的含量。 6月龄芽提取物具有显著的体外抗肿瘤活性对HeLa细胞的IC50值为56.8micro;克/毫升。这些结果表明蛇草早期收获（6）可能产生的次生代谢产物浓度的增加，它是强力的抗氧化物。

关键词：沙巴蛇草；总黄酮；查尔酮合成酶；DPPH；FRAP；HeLa癌

引言：作为一种优良的生物活性化合物的来源，药用植物一直利用传统医学与现代医学在保健品以及食品补充剂。它们也被用作药物的中间体和化学成分的合成药物。世界卫生组织（卫生组织）已经宣布，在发展中国家，80%的人使用传统的药物为他们的初级卫生保健，同时也注意到，这些地区的85%，这种药物来自植物提取物[ 1 ]。有些是从植物源提取的植物化学物质，包括酚类、黄酮类、生物碱、皂甙、鞣质、木质素。在实践中，这种材料被公认为有预防的能力，以及治疗，各种健康问题，如癌症，心脏病，糖尿病，高血压[ 2 ]。 今天，在医疗和食品行业的一个有价值的研究是评价植物化学物质，以确定他们是否有潜在的好处的生物活性，对人体健康[ 3 ]。最近，出现了一个明显的增加，利用植物作为一种天然抗氧化剂，清除自由基，4–[ 6 ]。特殊因子可影响中草药和药用植物中黄酮的含量。这些因素包括环境条件，年份和季节，随着植物的年龄，叶片成熟度，和类似的生长因子。它已经被弗里茨等人发现。[ 7 ]和[ 8 ]，有关年龄在酚类化合物含量和抗氧化活性通常伴随着增加在成熟植物的能力投入资源的次生代谢过程。 相比之下，更受限制的资源更年轻的植物，将利用在初级代谢过程中所需要的增长。阿克扎伊等人。[ 9 ]报道，最低数量的总酚在夹竹桃嫩叶，而杜鹃茎嫩叶，含有酚羟基的含量最高。因此，在年轻的植物和芽的叶中检测到的类黄酮含量大于在老厂。植物的药用特性随年龄的不同而不同。因此，在一个特定的年龄，在一个特定的季节，在加工前的药物生产，以避免任何改变其药物效力的真正的一部分，药用植物。

沙巴蛇草（clinacanthus nutans L.）最初被发现是在亚洲热带地区种植。本厂是一个众所周知的抗蛇毒在泰国传统治疗师。沙巴蛇草是利用马来西亚作为一个传统医学，特别是用于治疗皮疹、蝎子、昆虫叮咬。最初被发现是在亚洲热带地区种植。本厂是一个众所周知的抗蛇毒在泰国传统治疗师。沙巴蛇草是利用马来西亚作为一个传统医学，特别是用于治疗皮疹、蝎子、昆虫叮咬。它也可以用于治疗生殖器疱疹和水痘病变诊断免疫功能低下的人[ 11 ]。由于许多确定的有用的好处，这种作物，这也在马来西亚省，它是重要的，以确定其生物活性化合物和药物性能进行进一步的研究。 目前，小的是已知的次生代谢产物和这些组件的动态变化，在沙巴蛇草生长期。这是收集与高水平的这些潜在的有益成分的食品相关的重要证据。为了确定我国不同植物生长时期的生物活性化合物合成与药物质量的变化，对沙巴蛇草生物活性化合物的合成和药物质量的变化进行了研究。目前的研究的目的是评估变化中的黄酮类化合物和酚类与查尔酮合酶酶活性酸的生产以及研究其抗氧化和抗癌活性随生长时期沙巴蛇草。

2.1植物生长期总黄酮和黄酮浓度变化

所有的黄酮类化合物表现出良好的稳定性，在其保留时间。此外，在峰值区域内之间的天和重现性良好的重复性（RSD＜2%）获得了。在一般情况下，重复性和再现性是可以接受的，在所有样品中，表明在获得的结果的精度。表1沙巴蛇草黄酮类化合物的实验数据。三个植物生长周期和不同的植物部分之间的显着差异（对0.05）进行了观察。六个月大的芽有TF含量最高（6.32毫克/克干重] [ DW）其次是1岁的芽（5.42 mg/g DW）和6叶（4.66 mg/g DW）。如表1所示，每个黄酮化合物的浓度显着影响植物 木犀草素浓度植物年龄的影响；这黄酮类化合物的含量最高，在6芽观察（0.390 mg/g DW）。木犀草素是不是在1、6检测叶片。如表1所示，槲皮素浓度最高记录在6芽（1.669 mg/g DW），其次是1岁的芽（1.297 mg/g DW）和1岁的叶（1.203 mg/g DW）。总的来说，在这项研究中分离黄酮类化合物，黄酮类化合物的重要基于浓度从高到低依次为：儿茶素gt; gt; gt;槲皮素山奈酚木犀草素。结果表明，儿茶素在沙巴蛇草是丰富的，这是未来研究的一个重要的考虑因素。目前的研究结果与以前的报告是不一致的

表1沙巴蛇草提取物中总黄酮的含量及某些黄酮类化合物的检测。

数据测量标准偏差意味着plusmn;3。在对0.05个不同的测试中，不共享一个共同的单封信是显著不同的。所有的测量单位是毫克/克DW。未检测到。

2.2植物生长期总酚酸和酚酸浓度的变化

如表2所示，茶多酚含量受植物年龄和样本类型的影响。TP的含量范围为6.840和18.210 mg/g DW之间。六、1月龄芽有最高和最低的TP含量，分别。TP在1月龄植物产量低，但增加了6个月大的植物（叶中：55.2%芽：166%增加百分比）在1岁的植物再次降低（降低百分比15.1%；芽叶：：6.9%）。

表2沙巴蛇草提取物中总酚含量及酚类化合物的检测

数据测量标准偏差意味着plusmn;3。在对0.05个不同的测试中，不共享一个共同的单封信是显著不同的。所有的测量单位是毫克/克DW。只有在一个年轻的年龄（月龄）叶片中比在芽的TP含量；然而，在植物生长期间，TP浓度在芽显著增强。在目前的研究中，2个酚类化合物被确定在沙巴蛇草提取物。所有的提取物中检测到，咖啡酸，含量最高（0.307毫克/克DW）这是在1岁芽酚酸的检测。生产咖啡酸显著（P＜0.05）增加从1到1岁的植物。没食子酸在沙巴蛇草的合理浓度发现，2.166 mg/g DW在1岁的叶5.963 mg/g DW在6芽之间变化。

2.3酶查尔酮合成酶（CHS，EC 2.3.1.74）活动

酶查尔酮合成酶（CHS，EC 2.3.1.74）被发现并报道在植物细胞[ 21 ]黄酮类化合物代谢的关键酶。如图1所示，社区活动是由植物的年龄显着影响。社区卫生服务的最低和最高的活动水平在1、6花蕾3.6和9.5 nkat / mg蛋白值，分别。从1到6个月，CHS酶活性增强幼苗约80.4%和163.8%的叶子和芽，分别。相反，随着生长期从6个月到1年，CHS酶活性显著下降约21.6%和34.7%的叶、芽，分别。对黄酮类化合物合成的CHS酶作用机制已被以前的报告。

图1CHS活性在芽和沙巴蛇草的叶子的植物在不同年龄。误差条代表平均值的标准误差。

如图2所示，黄酮类化合物来源于CHS酶的存在下，4-香豆酰-CoA和丙二酸单酰辅酶A。这表明，CHS酶类黄酮0 2 4 6 8 10 12月大的芽芽叶6月龄的重要酶6叶1岁的芽叶1 CHS活性（nkat / mg蛋白）植物partsmolecules 2014，19 17637的合成。根据研究结果，从目前的研究中，它是假设，多酚类化合物对6芽和叶的增加可能是由于在CHS活性增加。小关等人。[ 22 ]报道，花色素苷积累的变化与CHS活性比苯丙氨酸解氨酶（PAL）活性呈正相关变化。与我

图2机构CHS酶对黄酮类化合物的合成[ 27 ]。

2.4体外抗氧化活性

2.4.1 1,1-二苯基苦基苯肼（DPPH）自由基的清除作用沙巴蛇草植物生长期

DPPH自由基清除活动沙巴蛇草的叶子和花蕾提取液在不同生长阶段如图3所示。不同生育期后，与叶提取物相比，芽提取物具有更高的自由基清除能力。DPPH活性也显著增加（P＜0.05）在芽、叶1个月和1年之间。观察在1岁芽提取物依次6芽DPPH的最高价值。如图2所示，2014分子的50%，19，17638清除自由基（IC50）观察到在1、6芽在浓度为64.6和73.5micro;克/毫升，分别。在最近的一项研究中，勇等人。[ 28 ]报道，DPPH活性沙巴蛇草提取物的IC50为观察

图3清除自由基（DPPH）不同生长年龄的芽和叶沙巴蛇草提取物。误差条代表平均值的标准误差。

表3 DPPH自由基清除率和不同生长年龄在100micro;mu;g／mL浓度的芽和叶沙巴蛇草提取物的IC50值。

数据测量标准偏差意味着plusmn;3。在对0.05个不同的测试中，不共享一个共同的单封信是显著不同的。

2.4.2铁还原抗氧化能力（FRAP）的活性

如图4所示的FRAP活动沙巴蛇草提取物显示为209mu;M Fe（II）/克之间（1月龄叶）和488mu;M Fe（II）/ g（6芽）。所有沙巴蛇草提取物的FRAP活性显著低于按标准抗氧化剂BHT和维生素C（512.5和849.8mu;M Fe（II）/克，分别）。过去许多研究都强调了黄酮和酚酸的药草和香料的潜在作用，可作为抗氧化剂[ 30、31 ]。有趣的是，的FRAP法结果显示6芽活性较高（Fe 488mu;M（II）/克）比1岁的芽（Fe 453mu;M（II）/ g），这与DPPH结果冲突。根据DPPH自由基的清除效果，1岁的芽。

图4生长期沙巴蛇草提取物的FRAP的活动。误差条代表平均值的标准误差。

2.5 多酚类化合物和抗氧化活性之间存在相关性

如表4所示，显著（P＜0.05）的相关性在沙巴蛇草提取物的DPPH和FRAP活动之间。TF含量与DPPH和FRAP活性显著相关；然而，TF和FRAP活性之间的相关性比TF和DPPH活性之间的强。黄酮类化合物的鉴定，只有儿茶素表明DPPH自由基活性显著相关。此外，槲皮素和山萘酚的显示与FRAP活性显著相关。TP含量与DPPH自由基也具有显著的相关性（R 2 = 0.811）和FRAP（R 2 = 0.97）的活性。的酚酸，没食子酸具有DPPH和FRAP活性显著相关。从数据中可以看出。显著的相关性（P＜0.05）CHS酶活性和FRAP之间活动，TF，儿茶素，和山柰素的含量进行观察。如表4所示，CHS酶活性与TP之间没有显著的相关性，咖啡酸和没食子酸的含量。

表4沙巴蛇草提取物化合物与抗氧化活性的相关性分析。

2.6体外抗癌活性

对次生代谢产物的抗氧化活性数据的基础上，6个月和1岁的芽和沙巴蛇草6叶提取物进行抗HeLa癌细胞的抗癌活性评价。初步筛选结果表明，沙巴蛇草提取物具有显著的抗肿瘤活性（P＜0.05）对Hela细胞浓度在56.8micro;mu;g／ml，与6花蕾提取物抑瘤率为50%（图5）。HeLa细胞的抑制76.7%时用它莫西芬治疗（阳性对照）浓度在56.8微克/毫升。micro;50%抑制浓度（IC50）的6个月和1岁的芽和沙巴蛇草6叶提取物在浓度值被发现 。根据国家癌症研究所（NCI），粗提物可以考虑如果具有小于20mu;g／mL，但mu;的IC50值为活跃的，在目前的研究中得到的IC50值下降，由粗提物的NCI推荐。这意味着是沙巴蛇草是不适合的抗癌药物发现对人宫颈癌，但它可以作为一种粮食作物健康促进特性。如图5所示，用上述浓度处理的正常细胞（IC50）沙巴蛇草提取物（6个月和1岁的芽和6叶）显示78.5，65.9，和73.8%的细胞存活率，分别。结果显示，所有的提取物是无毒的micro;低于240 g / mL的浓度，但毒副作用明显高于。

图5沙巴蛇草提取物对Hela细胞剂量依赖性的抗肿瘤活性（A）和正常细胞活力（B）。他莫昔芬作为阳性对照。误差条代表平均值的标准误差。

3试验段

3.1植物材料

沙巴沙巴的一个小塑料袋中，一个小的聚乙烯塑料袋中有一个茎切的茎切。发芽的茎生长2周转移到较大的聚乙烯袋中含有土、鸡粪混合物，燃烧稻壳在3:1

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