1-MCP对枇杷果实采后品质的影响外文翻译资料

 2022-03-29 21:32:32

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1-MCP对枇杷果实采后品质的影响

摘要：枇杷（Eriobotrya japonica Lindl，品种“洛阳青”）是一种采后不易贮存的水果。用1-甲基环丙烯（1-MCP：0.5，5和50mu;L/L）和乙烯（100mu;L/L）对枇杷果实进行采后处理并观察其对采后果实品质的影响，分别在20℃贮藏8天，0℃贮藏39d天以及20°C贮藏5天，用来进行了调查。在三种浓度下，5mu;L/L1-MCP处理对果实品质影响最大。收获后果实硬度会缓慢增加，并且这种增加与果实组织电导率的增加呈正相关。乙烯处理增强了果实的硬度而1-MCP处理则显着延迟了采后硬度的增加。枇杷果实采后果肉褐变会增加，这种增加与组织的总酚含量呈现着负相关，与多酚氧化酶（PPO）活性呈正相关。1-MCP处理后可以降低枇杷的脂氧合酶（LOX）和PPO活性，降低O2-积累。1-MCP处理能够保持细胞膜完整性，减少多酚的氧化，从而阻止相关酶参与褐变。果实硬度在0℃下储存的前几天增加，然后在果实被移到20℃后变化不大。果肉褐变在0℃下以及随后的货架期内明显加剧，1-MCP处理能够减少褐变，而乙烯处理则会增强褐变。1-MCP处理有助于枇杷果实保持的采后品质并提供更长的储存期限。

关键词：枇杷；采后；品质；1-MCP；乙烯；硬度；果肉褐变

1 简介

枇杷（Eriobotrya japonica Lindl。）是一种原产于中国的蔷薇科常绿乔木。其果实于初夏成熟，成熟时果实呈球形或椭圆形，颜色为橙黄色或白色，它皮薄而坚韧，肉质柔软多汁（Lin等，1999）。由于枇杷收获时通常炎热多雨，不利于其储存和运输。因此，枇杷采后损失较大。

枇杷已经被归类为一种非跃变型果实（Blumenfeld，1980年），随着果实成熟，会伴有果肉风味和口感的流失以及果肉发生褐变硬度增加，导致果实可滴定酸度下降，离子流失增加也导致多汁性下降（Lin等人，1999；xi和Zheng，1999；Zheng等，2000）。

水果的储存期限相对较短。据报道，低温可以抑制果实的呼吸作用以及乙烯产生，从而延长保存期限（Ding等人，1998），低温冷藏下显著冷害发生在1℃（Zheng等，2000）。一些品种的水果能够存储在5℃气调包装中2个月仍能保持其食用品质（Ding等，2002）。尽管取得了这些研究成果，但仍然需要更多的关于果实成熟的生理学和储存条件的研究信息，这些可能会增加果实的储存时间以及延长保质期。特别是，采后果肉硬度的显着增加原因仍然不是很清楚，虽然它已被认为是冷害的症状（Zheng等，2000），和Ding等（2002），中描述了软木果肉的发展以及果肉和果皮的粘附作用可成为果实储存障碍。

延长水果贮藏寿命的一种方法是控制乙烯生成和感应。尽管非跃变型果实的成熟可能与乙烯无关，但一些研究表明，乙烯对非跃变型果实如樱桃，柑橘以及草莓有一定影响。Gong等，（2002）报道说，外源乙烯刺激了甜樱桃果实的呼吸作用并加速了植物茎的褐变。乙烯也被证明参与了调控柑橘类水果的成熟和衰老（Porat等，1999）和能够加速草莓果实适应度的丧失（Tian等，2000）。虽然用1-甲基环丙烯（1-MCP）处理能够显着延长果实贮藏期限并且改善一系列非跃变型果实的品质（Blankenship and Dole，2003），1-MCP处理对柑橘，菠萝以及草莓等非跃变型果实的益处不一致。1-MCP能够抑制柑橘果实的脱绿和发霉，并且对不影响其果实的软化（Porat等，1999），1-MCP能抑制草莓的软化过程并且对其衰变进程没有影响（Tian等，2000；Jiang等，2001；Bower等，2003）。此外，1-MCP处理的效果随着浓度变化而变化。Ku等，（1999）发现低浓度的1-MCP通过延迟腐败来延长草莓果实的采后保鲜期，而高浓度的1-MCP则会加速衰老，在这项研究中，我们使用1-MCP和乙烯处理来改变果实成熟状态，并且提供20℃下成熟以及衰老期间枇杷果实生理学的理解。在第二个季节，我们跟踪1-MCP对0℃下贮藏果实的影响。我们的目标是提供可能会延长这种短暂作物储存寿命的信息。

2 材料和方法

2.1 水果，处理和储存

中国浙江黄岩的枇杷，品种“洛阳青”，成熟后采摘并在采摘当天运送到实验室。在收获前将果实装袋约60天（通常在盛开后120-130天包装水果以防止病虫害发展;收获时间约为190天）。在实验室中，对果实进行大小和成熟度进行筛选，要求形态一致并且没有机械损伤。实验中使用完全随机的设计。

将果实分成5个批次，每批240个果实，每个批次分成3个重复，每个重复80个。每个果实3个重复，分别进行5次处理：（1）对照果实（0mu;L/L1-MCP或乙烯），（2）0.5mu;L/L1-MCP，（3）5mu;L/L1-MCP，（4）50mu;L/L1-MCP和（5）100mu;L/L乙烯处理后在20℃下密闭密封的6L容器保存12h。然后将处理后的果实在92plusmn;98%的相对湿度下于20plusmn;0.5℃保存8d。按照Jiang等，（2001年）的描述进行1-MCP处理。通过将1.6gEthylBlocTM值粉末（和0.14%1-MCP）用水（35-40◦C）溶解在密封的1000mL玻璃烧瓶中来制备1000mu;L/L1-MCP原料气。为确定在每个容器（6L）中获得期望的1-MCP浓度（0.5，5.0，50mu;L/L）需将合适体积的1-MCP原料气使用注射器注入含有80（在20℃）或100（在0℃）水果中。注射后注射孔立即用胶带密封，然后将带有水果的容器在20℃放置12小时。

对于第二季进行的低温贮藏实验，将果实分成三批300个果实，每批包含100个果实的三个重复，并将100个果实置于密封的6L容器中。（1）对照果实（0mu;L/L1-MCP或乙烯），（2）5mu;L/L1-MCP和（3）100mu;LL/L乙烯。将果实在0℃保存39天，然后转移到20℃保存5天。

如下所述，从处理过的重复样品中取出样品进行各种测量和分析

2.2 测定果实释放的乙烯

为了测量乙烯，将来自每个重复的2个果实（每次处理2times;3）放入500mL烧瓶中。在8个储存日内每天测量每个瓶子乙烯产量。在密封1小时后，从每个烧瓶中通过注射器收集气体样品（1mL），使用安装有GDX-502柱的SP6800型气相色谱仪（中国山东鲁南化学工程仪器有限公司）测量乙烯浓度，检测温度为140°C。N2气载气流量为0.18mPa，火焰离子化检测器（FID）系统的空气和氢气压力分别控制在0.08和0.05mPa。

2.3 果实硬度和总可溶性固形物（TSS）含量

每次处理10个果实时，分别将来自三个重复样品的3、3和4个果实的样品测量硬度，分别在储存20℃的8天中进每2天进行一次测量，或者在第一个8天后每隔5天进行一次测量，如低温实验结果所示。每个果实在去除一小片果皮后，使用具有5mm直径探针，4mm穿透深度和1mm/s穿透速率的TA-XT2i（稳定的微系统，英国）质构分析仪在两侧进行测量并且用手持式折光仪（中国成都光学仪器厂）测定相同果实的TSS含量（%）。

2.4 可滴定酸度（TA）

为了测量TA，将来自每次重复处理的5个果实（每次处理3次）剥皮，切成小块，将水果样品（来自5个果实）用液氮速冻并在-20°C下储存备用。在20℃实验的8天中每天取样，或者每2天取样一次，然后每隔5天取样一次，作为低温实验的结果。Moradshahi等(1977)描述的方法。随后进行了修改。将1克冷冻的组织粉末加4.5毫升蒸馏水置于预冷的研钵中研磨。将匀浆过滤并用离心机以10000times;g离心10分钟后，用蒸馏水将上清液定容至10mL。样品在100℃加热5min来排除CO2，随后用现配的20mMNaOH滴定至pH8.2。H 的浓度以mmolkg-1表示。

2.5 脂氧合酶（LOX）

用于TA分析的相同冷冻样品同样用于LOX测定。将萨里（1963）的方法进行了修改。将冷冻的组织粉末（2g）加入10mL50mM磷酸钾缓冲液（pH7.0）于研钵中于4℃下研磨。将匀浆在4℃以4000times;g离心30分钟。取上清液（0.2mL）与2.78mL100mM乙酸钠缓冲液（pH5.5）和25mu;L亚油酸钠作为底物混匀，然后在30℃内在波长234nm下进行吸光度反应。将1分钟内在234nm处引起0.01的吸光度变化的酶的量被视为一个单位的LOX活性。

2.6 超氧自由基的产生率

用于TA分析的冷冻样品相同可用于测量超氧化物水平。随后对Elstner（1976）描述的方法进行了修改。在5mL50mM磷酸盐缓冲液，pH7.8（含有0.03g/LEDTA，0.3%TritonX-100和40g/LPVP的磷酸盐缓冲液）中加入冷冻的组织粉末（5g）并研磨。匀浆物以700times;g离心10分钟。上清液用于测定自由基含量：0.5mL上清液，0.5mL50mM磷酸盐缓冲液（pH7.8）和1mL1mM盐酸羟胺混合并在25℃下温浴1小时，加入1mL17mM对氨基苯磺酸（在冰醋酸酸：H2O=3:1）和7mM的-乙胺（在冰醋酸：H2O=3:1中），并将混合物在25℃下再温浴20分钟，然后立即测量530nm处的吸光度。

2.7 ACC含量，ACC合酶（ACS）和ACC氧化酶（ACO）

用于TA分析的冷冻的5个果实复制样品相同可用于这些测定。将冷冻的组织粉末称取3g并用6mL乙醇来萃取。将匀浆物以4000times;g离心15分钟。根据Lizada和Yang（1979）的方法，将上清液用于测定ACC并重复三次。将0.8mL上清液与0.1mL25mMHgCl2在管中混合，然后将其密封并在冰浴中冷却。然后，加入67mu;L预冷的5%NaOCl和33mu;L预先冷却的饱和NaOH，通过剧烈摇动混合溶液。使用SP 6800型气相色谱仪（中国山东鲁南化学工程仪器有限公司）从管中取出1mL气体样品用于ACC测量。通过从Fan等（1998）修改的方法测定ACS。称取冷冻的组织粉末（3.5g）加入10mL的400mM磷酸钾缓冲液（pH8.5），1mMEDTA，0.5%（v/v）巯基乙醇和10mu;M磷酸吡哆醛进行研磨。将匀浆通过六层粗棉布过滤，然后在4℃以4000times;g离心30分钟。弃去上清液，将沉淀物重悬于0.5mL含2mM磷酸钾缓冲液（pH8.5）：1mMEDTA，1mM巯基乙醇，10mu;M磷酸吡哆醛和0.1%（v/v）TritonX-100的缓冲液中。将反应混合物振荡30分钟，并在4℃以4000times;g离心10分钟。在0.8mL反应介质中，在32℃下测定0.2mL上清液的等分试样的酶活性1小时，所述反应培养基由提取物，250mu;MM-SAM（s-腺苷甲硫氨酸）和10mu;M磷酸吡哆醛组成。通过加入0.1mL50mMHgCl2终止反应。加入100mu;L5％NaOCl 饱和NaOH（v/v=2/1）后，立即将反应混合物振荡10秒。最后，30分钟后，将1mL等分的顶空气体用于乙烯的气相色谱分析。如Barry等（1996）所述，在冷冻组织粉末（2g）上测定体外ACO。重复三次。

2.8 导电率（EC）

用于硬度和TSS测量的相同的10个果实相同可用于电导率测量。果实保留为复制品（分别为3，3和4果实）。用直径为6毫米的不锈钢软木钻将每个果实的果肉组织塞子切下。用不锈钢剃刀片从每个插头上切下肉盘（2mm厚）。每套复制水果提供20个磁盘，每个处理提供3个磁盘。将圆片放入30mL0.8mM甘露醇水溶液中并温浴2小时。使用DJS1C电导率计（中国上海）定期测量溶液的电导率（EC0），然后将圆盘煮沸5分钟。在将溶液冷却至体积为30mL之前，测量溶液的总电导率（ECT）之前进行测量。相对电导率（%）=（EC0/ECT）times;100%。

2.9 内部褐变

用于硬度和TSS和EC测量的每种处理相同的10个果实用于评估内部褐变（IB）。这表现为核心附近的棕色变色，并且在垂直切割每个果实的中心后视觉评估。根据褐变面积，IB评估基于五个阶段，如下：0，无；1，褐变面积lt;5%；2，褐变面积5-25%；3，褐变面积25-50%；4，褐变面积gt;50%。结果表示为使用以下公式计算的IB指数：

IB指数 =（IB水平times;IB水平的果数）/（4times;样品中果实的总数）

水果被认为不适合消费者，其褐变指数为0.4或以上，或褐变等级为3-4。

2.10 总酚和多酚氧化酶（PPO）

用于TA分析的相同冷冻的5个果实复制样品可用于这些测定。通过将3g冷冻组织粉末与12mL80%乙醇均质化并且以12000times;g离心匀浆20分钟来提取总酚类物质。上清液用于酚类分析。采用Singleton和Rossi（1965）的方法测定总酚类物质，测定725nm处的吸光度。这些部分的吸收光谱用80%乙醇作为空白测定。

对于PPO，将5g冷冻组织粉末在20mL0.1M磷酸钠缓冲液（pH6）中与1g聚乙烯聚吡咯烷酮（PVP）一起匀浆，并将匀浆以20000times;g离心15分钟。上清液用于PPO活性。使用0.5mL100mM4-甲基儿茶酚，1.0mL0.1M磷酸钠缓冲液（pH6）和1.5mL上清液进行测定。记录在25℃410n

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