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译文

不同食用玉米淀粉水平对幼红沼虾—克氏原螯虾生长性能、酶活性和肝胰脏组织的影响

Xucheng Xiao , Dong Hana , Xiaoming Zhu , Yunxia Yang , Shouqi Xie , Ying Huang

摘要：我们通过一项为期八周的实验测试了幼红沼虾—克氏原螯虾利用不同水平玉米淀粉的能力。根据不同玉米淀粉水平（50，100，150，200，250，300和350g/kg）配制了七种实用等氮日粮。检测了成长指数、身体组成、alpha;-淀粉酶活性和肝组织形态变化。结果表明了克氏原螯虾存活率从71.1％至82.2％不等，并且没有受食用玉米淀粉水平的显著影响。摄食率（FR）随着玉米淀粉水平的提高而上升，与用超过250g/kg玉米淀粉喂食的组别并无明显差异。克氏原螯虾重量增益（WG）和饲料转化率（FCR）受到食用玉米淀粉水平的显著影响，在用200g/kg玉米淀粉喂食的螯虾中找到了最高增重和最低饲料转化率。其粗脂肪和肝胰脏脂肪含量随着食用玉米淀粉含量的增加而增加。在一定活性的alpha;淀粉酶，血淋巴葡萄糖和与食用玉米淀粉水平相关的肝糖原浓度中得到了饱和曲线，同时在含200g/kg到350g/kg玉米淀粉日粮喂养的螯虾中发现了最大活性。此外，螯虾展现出各组间的组织学显著差异。 在用150g/kg和200g/kg玉米淀粉喂养的螯虾中，肝胰脏组织形态学是正常的，有管道紧密排列。在这两组中，不同细胞类型可以分得很清楚并且在形状和尺寸上相当均匀。可以得出结论，这种螯虾的最佳玉米淀粉水平达到203g/kg时，日粮蛋白含量为350g/kg。

关键词：玉米淀粉，生长，alpha;淀粉酶，肝胰脏组织，克氏原螯虾

引言

碳水化合物是水产养殖饲料配方中能量最经济的来源。碳水化合物可以代替蛋白作为动物食物的能量来源，从而降低饲料生产成本，这已经有所记录。此外，已有的研究表明相对于消耗膳食蛋白，碳水化合物的利用能够导致含氮废物量的减少。因此，熟知动物利用碳水化合物的能力是很重要的。

有很少一部分研究用来确定碳水化合物的类型和水平对甲壳动物的影响。在斑节对虾囊幼体中，存活率受碳水化合物水平的影响，海藻糖比蔗糖和葡萄糖能够促进更好的成长。这表明了鲍鱼属的最佳膳食玉米淀粉含量为47.81%。同时发现33%的食用碳水化合物限制了细角滨对虾幼体的生长。

在大多数的水产饲料中，由于单糖提高了非正常死亡率，淀粉已经被用来作为主要的碳水化合物来源。食用单糖能被迅速吸收，但利用率差。由于这些原因，许多学者认为在虾的食物配方中加入像淀粉一样更复杂的碳水化合物，在同化前经过酶的水解，让葡萄糖在肠道中更慢的被吸收，Shiau和Peng证实了玉米淀粉可以被更好地利用，而且相比于糊精和葡萄糖在幼虾中有更高的蛋白质沉积。

在中国内陆，红色沼虾—克氏原螯虾最近成为了一个很受欢迎的淡水养殖物种，因为这种虾有着很高的市场价值和消费需求。鉴于其具有较高的增长率，易于管理和高收益，因而具有较高的养殖潜力。2010年年产达到了563000吨。对克氏原螯虾以往研究所采用的新鲜饲料和半纯化饲料测试了生长率并推荐了最佳营养需求，Jover等人发现，当蛋白含量达到22–26%时，克氏原螯虾对碳水化合物的需求量为36–41%。Hubbard等人也发现最佳生长状态出现在用含30%粗蛋白和2.5k cal/g膳食能量日粮喂养的情况下。迄今为止，很少有人关注克氏原螯虾对碳水化合物的利用。

本研究的目的是探讨克氏原螯虾实用日粮中的最佳饲料玉米淀粉水平，从生长性能、身体组成，alpha;淀粉酶的活性和肝胰脏组织学上进行深入挖掘。

材料和方法

2.1实验日粮

配制含有50，100，150，200，250，300和350g/kg玉米淀粉的七种等氮日粮。鱼粉被用来作为主要膳食蛋白质的来源。实验日粮配方和化学成分如表1所示。把油和水添加到干燥的组分中，彻底混合搅拌成可口的日粮，海藻酸钠被用来作为粘结剂。然后通过挤压机把饲料做成1毫米直径大小的颗粒，60度烘干并储存在4度备用。

表1实验日粮配方和各组分含量（干重单位g/kg）

2.2实验动物和饲养条件

幼体克氏原螯虾在2010年11月份从中国湖北的渔业科学研究所通过孵卵得到，在实验开始之前，螯虾被储存在十个90升的聚乙烯容器里(水深15厘米)。为了减少攻击性行为,一些顶部小片(13times;16times;6厘米)被放置在容器底部周围用来作为遮挡物。每天两次喂食饱腹并持续两周，用七种实验日粮等量的混合物进行驯化。

在最初的实验中,收集初始质量为0.39plusmn;0.00克的健康幼体克氏原螯虾，然后随机分配到21个容器里(容积90 L,直径70厘米)，密度为每个容器15只幼体。三个容器被随机分配到七种处理中。四个顶部小片被放置在罐底的四边来模拟自然栖息环境。每个容器里的水深保持在约15厘米,每天早上在喂食前用充气自来水取代约50% -60%的容器水。在实验过程中,提供给容器连续的充气以确保溶解氧浓度大于6毫克。水温保持在19plusmn;2℃,pH值在6.8和7.0之间,氨氮浓度小于0.45mg/L，使用适当的方法每两周检测一次。光周期是12h有光，12无光。8周试验期间,螯虾用实验饲料一天两次喂养饱食。4h后用虹吸收集吃剩的食物残渣,70度烘干并称重。食物残渣的浸出率是通过将一定量的食物放在没有虾的容器里,4小时后收集,烘干和重新称量来检测的。浸出率是用来校准食物残渣的，每天在记录每次喂养和死亡率之前，粪便和新褪下的壳要移除。

2.3样品收集

在实验结束的时候,螯虾被禁食24小时以清除胃肠道吸收的食物,然后放置在一个寒冷的环境中使其昏迷。只有在蜕皮螯虾的C或D1阶段才从每次日粮喂养处理后采样。血淋巴是利用注射器从每个容器的三只螯虾中抽取。肝胰脏随后被移除，随后采样测定alpha;淀粉酶的活性,肝胰脏糖原和脂肪含量分析。在每个容器里的另外四只螯虾也采样并存储在-20 °C，以便于做全身组成分析。

2.4生化分析

冷冻肝胰脏样本用冰冷的缓冲液均质化。均质化的悬液在四度以664g的转速离心10分钟，随后用于alpha;淀粉酶活性和肝胰腺糖原含量的测定。根据一种改进后的伯恩菲尔德alpha;淀粉酶活性测量方法，即使用1%的糖原作为底物，用2.5nM的MnCl₂ 和10mM的NaCl溶液和pH值为7的磷酸盐缓冲液进行稀释。根据范·汉德尔(1965）方法提取肝胰脏糖原。用Bradford法以牛血清白蛋白作为标准测定组织总蛋白浓度（1976）。用商业试剂盒测定血淋巴葡萄糖（上海生物工程有限责任公司），而且也适用于采用20微升的血浆和200毫升显色酶试剂进行微孔板测定。吸收值被记录在酶标仪中（BIO-RAD型号550），根据标准溶液底物的浓度进行浓度计算。

对试验日粮中的水分、粗蛋白、脂类、灰分和能量含量进行了分析。通过在105度下干燥至恒重计算出水分含量。粗蛋白质含量测定是采用自动氮分析仪（全自动凯氏定氮仪2300；福斯公司，

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